載體是DNA片段的裝載骨架,這個(gè)DNA片段可以是一段編碼氨基酸的序列,一個(gè)miRNA,一個(gè)RNAi的發(fā)夾結(jié)構(gòu),或者CRISPR的sgRNA. 設(shè)計(jì)合理的載體應(yīng)該包含多種功能元件,比如啟動(dòng)子,抗性篩選標(biāo)記,慢病毒或者逆轉(zhuǎn)錄病毒包裝元件,報(bào)告基因等。
構(gòu)建載體是OriGene為分子生物學(xué)家服務(wù)的專(zhuān)長(zhǎng)之一。 OriGene所有的質(zhì)粒產(chǎn)品都是構(gòu)建在自己研發(fā)的經(jīng)過(guò)全面質(zhì)檢和數(shù)千萬(wàn)引文文獻(xiàn)驗(yàn)證的載體上。
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相同的ORF插入片段,可構(gòu)建于多種不同載體,適用于各種應(yīng)用
所有TrueORF插入片段均克隆到pCMV6-Entry載體,可以非常方便的通過(guò)剪切-連接克隆到目標(biāo)載體上。由于擁有非常多的目標(biāo)載體,TrueORF克隆可以非常方便多種下游蛋白研究。
可供選擇的目的載體有:
1. 用于蛋白純化檢測(cè)的多種表位標(biāo)簽
2. 蛋白可視化的多種熒光標(biāo)簽
3. 多種可用于穩(wěn)定細(xì)胞系構(gòu)建的抗性篩選標(biāo)記
4. E.coli 表達(dá)載體
所有的HuSH shRNA質(zhì)粒都被克隆至pRS、pGFP-V-RS 或 pRFP-C-RS載體中,可用于瞬時(shí)轉(zhuǎn)染和穩(wěn)定轉(zhuǎn)染,也可通過(guò)復(fù)制缺陷的逆轉(zhuǎn)錄病毒將shRNA表達(dá)盒穩(wěn)定傳送至宿主細(xì)胞。pGFP-V-RS 和 pRFP-C-RS載體提供了額外的turbo-GFP 和 turbo-RFP熒光蛋白表達(dá),便于監(jiān)測(cè)單個(gè)基因或雙基因轉(zhuǎn)染。
OriGene提供多種CRISPR/Cas9載體,可用于基因編輯
1. All-in-One 載體: 包含gRNA 和 Cas9 (慢病毒載體可供選擇)。
2. T7 載體: 可用于gRNA 和 Cas9 mRNA生物體外表達(dá)
3. Cas9 Nickase: 減少脫靶效應(yīng)
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